新型异喹啉类化合物12-4-Y对活化肝星状细胞凋亡的影响及其机制研究

目的 探讨新型异喹啉类化合物12-4-Y[1-乙基-8-甲氧基-5苯基吡唑并（5,1-a）异喹啉]对大鼠肝星状细胞（HSC）凋亡的影响,并探讨其可能的机制。方法 以不同浓度（5、10、20、40和80μg/ml）12-4-Y处理HSC-T6细胞,分别于孵育后12h、24h、36h和48h收集细胞,以MTT法检测细胞增殖,以Hoechst染色对凋亡定性,以流式细胞分析对凋亡定量,应用Western blot检测凋亡关键蛋白Caspase3表达变化。结果 12-4-Y处理12h可浓度依赖性（在5～80μg/ml范围内）抑制HSC-T6细胞增殖,细胞增殖率分别为（1.086±0.013）、（1.055±0.019）、（0.957±0.012）、（0.793±0.021）和（0.553±0.031）,均显著高于对照组水平（1.215±0.014,P〈0.05）;12-4-Y（20μg/ml）处理可时间依赖性抑制HSC-T6细胞增殖,在12 h、24 h、36 h、48 h,细胞增殖率分别为（0.957±0.012）、（0.852±0.024）、（0.641±0.032）和（0.492±0.017）,与对照组（1.318±0.007,P〈0.01）差异具有显著性;12-4-Y（20μg/ml）处理24h时,Hoechst染色显示HSC-T6可见明显凋亡小体,流式细胞分析显示凋亡率为（29.23±1.20）%,显著高于对照组[（5.47±1.39）%,P〈0.001];蛋白质印迹显示凋亡关键蛋白Caspase3的裂解产物表达亦显著增加。结论 新型异喹啉类化合物12-4-Y可显著诱导活化HSC凋亡,其机制与激活凋亡关键蛋白Caspase3有关。