靶向UCP-2基因siRNA慢病毒转染对胰腺腺泡细胞AR42J坏死、凋亡的影响及机制探讨

目的观察靶向解偶联蛋白2（UCP-2）基因小干扰RNA（siRNA）慢病毒转染对胰腺腺泡细胞AR42J坏死、凋亡的影响，并探讨其相关机制。方法构建靶向UCP-2基因siRNA慢病毒载体，转染AR42J细胞（实验组），并设立阴性对照组及空白对照组。荧光显微镜镜检确定感染效率，实时定量PCR检测各组细胞的UCP-2mRNA。以1×10^8 mol／L的蛙皮素刺激AR42J细胞，采用AnnexinV／PI双标流式细胞仪检测蛙皮素刺激后不同时间点AR42J细胞的坏死率和凋亡率，同时检测细胞内的ATP、活性氧簇（ROS）。结果成功构建了滴度为5X10。TU／mL的UCP-2基因siRNA慢病毒载体；实验组细胞UCP-2mRNA表达明显降低，各时间点AR42J细胞凋亡率及其ROS、ATP水平显著高于阴性对照组（P均〈0．05），细胞坏死率则显著低于阴性对照组（P〈0．05）。结论靶向UCP-2基因siRNA慢病毒转染可抑制AR42J细胞的UCP-2基因表达，促进细胞凋亡，抑制细胞坏死，其作用机制与其增加AR42J细胞内ROS、ATP表达有关。