利用siRNA抑制NF-κB p65蛋白表达对EOMA细胞中TF表达影响
2012
目的探讨针对小鼠EOMA细胞核冈子KB(NF—KB)的小干扰RNA(siRNA)对细胞c}t组织因子(TF)表达的抑制作用。方法设计并化学合成针对小鼠NF—KBp65的siRNA,按照实验分组分别转染小鼠EOMA细胞,转染24h后,在相应细胞中加入肿瘤坏死因子α(TNF-α,终浓度为20mg/L),于此后6h分别提取各组细胞总蛋白及RNA,检测细胞内NF—KBp65蛋白表达和TF的mRNA水平。结果TNF-α.刺激6h后,与空白对照组相比,阴性对照组、scramblesiRNA组细胞内NF—KBp65蛋白表达和TFmRNA水半增加,而siRNA组则明娃受到抑制;TNF组、TNF+scramblesiRNA组细胞内NF—KBp65蛋门表达和TF mRNA水平明显增加,TNF+siRNA组细胞内NF—KBp65蛋白表达和TFmRNA水平较卒白对照组有所增加,但明显低下TNF纽、TNF+scramblesiRNA组(P〈0.01)。结论利用siRNA抑制NF—KBp65蛋白表达可以有效地抑制NF—KB下游靶慕因TF的表达。
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