HIGH SENSITIVE PCR METHOD FOR DETECTION OF PATHOGENIC Leptospira spp. IN PARAFFIN-EMBEDDED TISSUES

El presente estudio describe el desarrollo y aplicacion de un nuevo ensayo de PCR para la deteccion especifica de leptospiras patogenas y su comparacion con un protocolo reportado previamente. Se disenaron nuevos cebadores para la optimizacion y evaluacion de la PCR en tejidos embebidos en parafina infectados artificialmente. La PCR se aplico ademas a muestras de tejidos embebidos en parafina y se realizo la secuenciacion del amplicon resultante. La PCR disenada fue mas eficiente que el protocolo reportado, permitiendo la amplificacion del fragmento de ADN esperado en las muestras infectadas artificialmente y del 44% de las muestras post mortem. Se secuenciaron 10 amplicones provenientes de pacientes diferentes. La aplicabilidad de una herramienta altamente sensible y especifica en la busqueda de leptospiras patogenas en especimenes histopatologicos podria facilitar una mejor valoracion de la prevalencia y la epidemiologia de la leptospirosis, la que constituye un problema de salud en disimiles paises.