利用无标记的分子信标及核酸染料SYBR Green I检测乙肝病毒

本文以野生型的乙型肝炎病毒(HBV)核酸片段为研究对象, 利用无标记的分子信标及核酸染料SYBR Green I, 建立了一种高灵敏、高选择性的特定序列核酸检测方法. 在优化条件下, 目标DNA浓度为4 × 10 -11 ~400 × 10 -11 mol/L之间时, SYBR Green I的荧光强度(DI)与目标DNA的浓度( C )具有良好的线性关系, 其拟合的回归方程为DI = 1.9556 C + 31.4659 ( R 2 = 0.9956), 方法检测限(3s)为2 × 10 -11 mol/L. 该方法操作简单、检测速度快、灵敏度高、重现性好、检出限低. 利用该方法, 结合不对称PCR技术, 实现了对HBV的定量检测.