人Delta-like1^ext-Fc融合蛋白毕赤酵母表达载体的构建及表达

2008 
目的:构建人Delta-like1^ext-Fc融合蛋白毕赤酵母表达载体PIC-hDll1^ext-Fc,并在毕赤酵母GS115中表达。方法:以pEF-BOSneo-hdll1^ext-Fc为模板PCR扩增人Delta-like1胞外段。通过DNA重组构建毕赤酵母表达载体PIC-hDll1^ext-Fc。用MD平板筛选重组子,G418筛选高拷贝转化子,经甲醇诱导表达后,SDS-PAGE、Western blot分析表达蛋白。结果:hDll1基因的胞外段被有效地扩增。序列分析表明,所构建的含hDll1^ext-Fc融合基因的质粒与设计相同,融合蛋白hDll1^ext-Fc得到正确表达。结论:成功地扩增了人Delta-like1胞外段,构建了hDll1^ext-Fc融合基因的毕赤酵母表达载体PIC-hDll1^ext-Fc,并在毕赤酵母中正确表达,为进一步研究奠定了实验基础。
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