Etude de l'organisation transcriptionnelle et de la régulation post-transcriptionnelle du groupe d'ORF codant l'érythrose 4-phosphate déshydrogénase, la phosphoglycérate kinase et la Fructose-1,6-bisphosphate aldolase de classe II chez Escherichia coli : Applications à la production de protéines recombinantes

Le triplet d'ORF Erythrose-4-phosphate deshydrogenase (E4PDH)-phosphoglycerate kinase (PGK)-fructose-1,6-bisphosphate aldolase (FBA), correspondant a trois enzymes intervenant dans le metabolisme du carbone, est retrouve uniquement dans une partie des γproteobacteries. Nous avons montre que, chez Escherichia coli, ce triplet d'ORF forme un operon comportant un promoteur fortement regule epd P0 et un promoteur etendu pgk P1. Les differents transcrits obtenus sont ensuite matures par la RNase E au niveau des regions epdpgk et pgk-fbaA, ce qui conduit a une stabilite differentielle des differents transcrits, avec par ordre croissant de demie-vie epd, pgk et fbaA. Par des experiences en fermentation continue, nous avons montre que le taux d'expression des ORF epd, pgk, fbaA et gapA augmente lorsque le taux de croissance augmente. La faible production d'acide acetique par les bacteries possedant un transporteur EIIBCGlc inactif nous a conduit a tester si ces bacteries pouvaient etre interessantes pour la production de proteines recombinantes. Nous avons mis au point des conditions permettant d'obtenir une forte densite cellulaire et une forte production de proteines recombinantes.