酿酒酵母β-葡聚糖对绵羊瘤胃上皮细胞β-防御素-1表达的影响

为了探索β-葡聚糖对绵羊瘤胃上皮细胞（ruminal epithelial cells，RECs）β-防御素-1（sheep β-defensin-1，SBD-1）表达的影响。本研究首先建立绵羊RECs培养体系作为体外试验模型，用不同浓度（0、5、10、20、50和100 μ g·mL -1 ）的β-葡聚糖刺激RECs 8 h后，利用qPCR和ELISA方法检测RECs中SBD-1的表达变化，选出诱导SBD-1表达最高的β-葡聚糖浓度。然后用β-葡聚糖的最佳刺激浓度对RECs分别刺激0、2、4、8、12和24 h，同样利用qPCR和ELISA方法对RECs SBD-1的表达变化进行检测，从而筛选出诱导SBD-1表达最高的刺激时间。qPCR和ELISA结果显示，β-葡聚糖（5~100 μ g·mL -1 ）刺激RECs 8 h后，SBD-1 mRNA和蛋白的表达随着β-葡聚糖浓度的升高均呈现先升高后降低趋势，且当β-葡聚糖浓度为10 μ g·mL -1 时SBD-1 mRNA和蛋白的表达量极显著高于对照组（ P μ g·mL -1 的β-葡聚糖刺激RECs 0~24 h后，qPCR结果显示，10 μ g·mL -1 的β-葡聚糖刺激RECs 2 h时 SBD -1 mRNA的表达量最高（ P μ g·mL -1 刺激RECs 4 h后SBD-1蛋白分泌水平达到最高（ P μ g·mL -1 β-葡聚糖会对绵羊RECs活力产生显著的影响（ P μ g·mL -1 的β-葡聚糖分别刺激RECs 2和4 h后SBD-1的mRNA和蛋白表达达到最高。