MicroRNA570通过Wnt／β-catenin通路抑制人结肠癌HT-29细胞的增殖及调控机制

目的：探讨microRNA570（miR-570）对人结肠癌细胞株HT-29生物学特性的影响，并阐明其对Wnt／β-catenin通路的影响机制．方法：将miR-570mimics转染人结肠癌细胞株HT-29后，采用cell counting（CCK-8）法检测细胞增殖变化，应用实时定量PCR技术检测转染后HT-29细胞中miR-570的表达，Westernblot技术及实时定量PCR技术检测各组中胞核及胞浆内β-catenin的变化，及对Wnt／β-catenin通路下游基Nc-myc、cyclinD1和survivin表达的影响．结果：HT-29细胞转染miR-570-mimics后，HT-29细胞增殖能力下降，72h细胞增殖抑制率最为明显，约为53．23％±1．22％（P〈0．05）．实时定量PCR结果显示miR-570表达上调20倍（20．01±0．32）（P〈0．05）．Western blot技术及实时定量PCR技术检测显示，β-catenin、c-myc、cyclinD1和survivin蛋白表达和mRNA表达均下降（P〈0．05），而空白对照组与阴性对照差异无统计学意义．Western blot结果进一步证实胞核内β-catenin的蛋白表达量下降明显，而胞浆内，β-catenin的蛋白表达量无明显变化．结论：miR-570能明显抑制人结肠癌细胞株HT-29的增殖，并下调Wnt相关基因的表达，其可能作为抑癌基因参与Wnt/β-catenin信号通路的调节．