月季 RhPR 10.2基因克隆及生物学功能分析

为解析月季PR-10家族基因 RhPR 10.2在月季花瓣衰老中的生物学功能，采用Real-Time PCR、RACE PCR、异源过表达、VIGS（病毒诱导的基因沉默）等生物技术方法，分析了月季 RhPR 10.2基因在月季不同开放阶段花瓣中的表达谱，克隆了 RhPR 10.2基因全长，构建了pSuper1300- RhPR 10.2异源过表达载体以及pTRV2- RhPR 10.2 VIGS载体.结果表明， RhPR 10.2基因的表达受月季花瓣衰老显著诱导，其开放阅读框为483 bp，编码160个氨基酸，含有PR-10家族特有的P-loop基序；蛋白分子式为C 796 H 1250 N 204 O 239 S 2 ，分子量为17 566.02，等电点（pI）为6.07；RhPR10.2蛋白与葡萄VvPR10.1亲缘关系最近；与拟南芥野生型植株（WT）相比，异源过表达 RhR 10.2基因的拟南芥T2代纯合子植株表现出显著延迟叶片衰老的表型，伴随着更高的叶绿素含量以及更低的离子渗透率；此外，与TRV2对照相比，沉默 RhPR 10.2基因的月季花瓣表现出加速衰老的表型，伴随着更高的离子渗透率以及衰老marker基因 RhSAG 12的表达.