DNA引物酶抑制剂碘化-3,3'-二乙基-9-甲基-硫杂羰花青诱导人白血病HL-60细胞凋亡

2006 
目的研究DNA引物酶抑制剂碘化-3,3’-二乙基-9-甲基-硫杂碳花青(DMTCCI)质导人粒细胞性白血病HL-60细胞凋亡并探索其机制。方法分别采用不同浓度的DMTCCI处理培养于RPMI-1640培养基的HL-60细胞采用MTT法检测DMTCCI对HL-60细胞的生长抑制作用:采用流式细胞仪和DNA琼脂糖凝胶电泳方法检测细胞凋亡。采用蛋白免疫印迹(Western blotting)法观察凋亡相关蛋白survivinBcl-xL,Bad,Bax,Bcl-2,caspase-9,caspase-3,caspase-6,PARP,DFF45和laminB的表达:采用ApoAlert Caspase-3分析试剂盒检测caspase-3的活性.结果DMTCCI具有抑制人白血病HL-60细胞增殖的作用,其IC50值为0.24μmol·L^-1.流式细胞仪和DNA琼脂糖凝胶电泳结果显示,DMTCCI可诱导HL-60细胞凋亡:在经DMTCCI处理的HL-60细胞中,survivinBcl—xL蛋白的表达水平下调,Bad和Bax蛋白的表达水平上调,Bcl-2蛋白的表达水平无变化,caspase-9,caspase-3,easpase-6,PARP,DFF45和laminB被分别裂解,产生相应裂解产物。在HL-60细胞中,caspase-3的活性在1μmol·L^-1DMTCCI处理3h时明显升高,在处理12h时达到最高峰。结论DMTCCI可抑制人白血病HL-60细胞的增殖并诱导其发生细胞凋亡。Bcl-2家族蛋白、survivin和caspases家族蛋白可能参与了上述诱导HL-60细胞凋亡的过程。
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