Genótipo e expressão da proteína fluorescente verde melhorada em ratos da linhagem LEW-Tg (EGFP) F455.5/Rrrc

A proteina fluorescente verde (GFP) foi descrita pela primeira vez apos ter sido extraida de Aequorea victoria em 1987. Desde entao, a GFP e seus derivados tem sido amplamente utilizados em varias experiencias como marcador celular e de proteinas. O objetivo do presente estudo foi o de verificar o genotipo dos descendentes de cruzamentos entre ratos Lewis LEW-Tg (EGFP) F455.5/Rrrc heterozigotos e de analisar a expressao da proteina fluorescente verde melhorada (EGFP) em diferentes tipos celulares e genotipos. O genotipo da descendencia foi avaliado por PCR e pela analise da expressao da EGFP em diferentes celulas e genotipos, incluindo-se as celulas-tronco mesenquimais (MSC) derivadas de tecido adiposo e de osteoblastos de calvaria. A expressao da EGFP foi verificada por citometria de fluxo, microscopia de fluorescencia e imunocoloracao. Foram, identificados os genotipos da descendencia e determinados os niveis de expressao de EGFP em dois tipos de celulas. Foi tambem constatada uma diferenca de expressao entre os genotipos (EGFP +/+) e (EGFP +/-) alem da presenca de autofluorescencia. Mais estudos sao necessarios para esclarecer a fluorescencia natural de celulas com o genotipo (EGFP +/-) e aquela induzida pela presenca da EGFP.