Identification d’une population CD44+/CD45− au sein des carcinomes sarcomatoïdes pulmonaires

Introduction Les cellules souches tumorales ont des proprietes d’autorenouvellement et de proliferation. Le phenotype membranaire CD44+/CD45− a ete identifie comme etant un marqueur de cellules souches tumorales dans les carcinomes bronchiques non a petites cellules (CBNPC). Les carcinomes sarcomatoides pulmonaires (CSP) sont un sous-type rare, agressif et chimio-resistant de CBNPC. Les objectifs de ce travail sont d’identifier une population CD44+/CD45− a partir de cultures primaires et de prelevements humains de CS et de comparer quantitativement et qualitativement cette population a celle des CBNPC. Materiel–methodes Sept cultures primaires issues de CSP ( n  =  6 ) et de CBNPC ( n  =  1 ) ainsi que 5 lignees commerciales (A549, H322, H441, H1299, H1650) etaient disponibles au laboratoire. Vingt prelevements (plvts) tumoraux frais issus de CSP ( n  = 4) ou de CBNPC ( n  = 16) (tumeurs primitives pulmonaires n  = 14, localisations secondaires n  =  6 ) ont ete recueillis. Onze plvts frais ont ete mis en culture (CSP n  = 3 ; CBNPC n  = 8). La population CD44+/CD45− a ete isolee sur les cultures primaires ( n  = 10), sur les lignees commerciales (n  = 5) et sur 17 plvts frais (CSP n  = 2 ; CBNPC n  = 15) par cytometrie de flux (anti-CD44, anti-CD45, controles isotypiques, iodure de propidium). Un tri cellulaire automatique couple a la cytometrie a ete realise pour 13 plvts frais, 2 lignees commerciales et 4 cultures primaires suivi d’une mise en culture des cellules CD44+/CD45− pour tests de clonogenicite et de proliferation. Resultats Parmi les 11 plvts mis en culture, 3 ont donne des cultures primaires, tous etaient issus de CSP. Parmi les plvts mis en culture et les lignees disponibles au laboratoire, les cultures primaires sarcomatoides ( n  = 9) etaient plus enrichies en population CD44+/CD45− que les lignees commerciales de CBNPC ( n  = 5) et une culture primaire issue de CBNPC (87 % [73,3–93,3] vs 22,6 % [0–91,95] vs 81 % ; p  = 0,031). Dans les plvts frais ( n  = 7), le taux de cellules CD44+/CD45− etait plus eleve dans les plvts tumoraux que dans les plvts normaux (6,12 % [3,00–9,84] vs 0,87 % [0,27–4,69] ; tendance). Le taux de cellules CD44+/CD45− etait plus eleve dans les plvts tumoraux de CSP ( n  = 2) que dans les plvts de CBNPC ( n  = 5) (7,98 % [6,12 %–9,84 %] vs 0,8 % [0,15 %–10,5 %] ; tendance). Dans les lignees et les cultures primaires, la proliferation avait tendance a etre plus importante dans la population CD44+/CD45− que dans la population CD44−/CD45−. La proliferation avait tendance a etre plus importante dans les cultures primaires de CSP que dans les lignees commerciales. Nous poursuivons le recueil de prelevements frais ainsi que les tests de proliferation et de clonogenicite. Conclusion Il est possible d’individualiser une population CD44+/CD45− dans les CSP. Les resultats preliminaires suggerent que cette population a des caracteristiques de cellules souches tumorales.