Naše první zkušenosti s využitím kometového testu při hodnocení integrity DNA ve spermiích

Novotna B, Svobodova L, Cechova M, Jarolim L, Chocholatý M, Bagryantseva Y, Macek M Sr., Macek M Jr. Nase prvni zkusenosti s využitim kometoveho testu při hodnoceni integrity DNA ve spermiich. Hlavni stanovisko prace: Na zakladě literarnich udajů autoři upozorňuji na význam hodnoceni integrity DNA ve spermiich při vysetřovani přicin neplodnosti. Informace je doplněna vlastnimi experimentalnimi výsledky ziskanými kometovým testem a komercnim kitem Halosperm. Cil: Abnormality v uspořadani chromatinu a/nebo struktuře DNA spermii mohou výrazně snižovat fertilizacni potencial jedince i při normalnim spermiogramu. Při identifikaci přicin mužske neplodnosti je proto v poslednich letech kladen důraz i na hodnoceni integrity DNA ve spermiich. Na nasem pracovisti jsme se rozhodli k těmto ucelům použit kometový test a komercně dostupný test Halosperm s cilem porovnat obě metody při vysetřovani kontrolnich jedinců a pacientů s poruchami plodnosti. Soubor pacientů a metody: U 32 kontrolnich jedinců, 24 mužů s neplodnosti a 26 mužů s cevnimi poruchami mužských pohlavnich organů (MPO) byla provedena konvencni analýza semene a nasledně vysetřeny hladiny fragmentace DNA ve spermiich pomoci kometoveho test a Halospermu. Výsledky: Korelacni analýza potvrdila dobrou shodu mezi výsledky obou metod (Pearsonův korelacni keficient r=0,241; p<0,05), na rozdil od kometoveho testu vsak výsledky Halospermu korelovaly i s motilitou (r=0,4365; p<0,001). Naproti tomu při hodnoceni kometovým testem obě skupiny pacientů vykazovaly výrazně vyssi poskozeni DNA ve spermiich než kontroly (t-test, v obou připadech p < 0,001), zatimco s pomoci Halospermu se podařilo prokazat zvýseni hladin fragmentovane DNA oproti kontrolam pouze u skupiny mužů s neplodnosti (p < 0,001). Z hodnot kometoveho testu v kontrolnim souboru byla stanovena hladina poskozeni 32 % Tail DNA jako horni mez tolerancniho intervalu indikujici snižený fertilizacni potencial. Zavěr: Kometový test se osvědcil jako vhodna doplňkova metoda ke standardnimu vysetřeni kvality spermatu.