应用高通量测序方法研究CRF01-AE亚型HIV-1毒株耐药突变的分子进化规律

目的  探讨CRF01-AE亚型人类免疫缺陷病毒1型（HIV-1）毒株在药物选择压力下耐药突变发生和演变的规律。 方法 选取5例一线方案治疗失败的CRF01-AE亚型HIV-1患者，收集其6~8年抗病毒治疗过程中的系列血样，应用高通量测序方法进行基因型耐药突变分析。 结果  ① 5例患者在启动治疗后早期即出现M184V突变以及非核苷类逆转录酶抑制剂（NNRTIs）类耐药突变，常见的有K101E、G190A和K103N，其中M184V+G190A+TAMs是常见突变组合，停药或更换二线药物，这些突变也始终存在。②胸腺嘧啶脱氧核苷类似物变异（TAMs）突变形成过程中，有3例患者表现为TAM2路径，1例患者为TAM1途径，还有1例患者前期只有TAM2路径的突变，后期累加上TAM1途径的突变。③有3例患者在治疗过程中分别形成TAMs、Q151M复合体和T69插入复合物等多重耐药突变，更换二线方案后仍然治疗失败。 结论  ① CRF01-AE亚型耐药患者在用药早期即开始出现耐药突变，数种突变逐渐累加，最终导致临床耐药，应尽早进行耐药突变监测。② TAMs突变通过2种途径竞争性发展，CRF01-AE亚型更偏向于TAM2途径，但随着治疗时间延长，2种途径可以产生融合。③更换二线方案前应排查针对替诺福韦（TDF）的耐药突变，其可能会导致二线方案无效。