细粒棘球绦虫重组CTxB-Eg95(TP)融合蛋白的原核表达

目的 构建CTxB-Eg95（TP）融合基因原核表达载体,并诱导表达CTxB-Eg95（TP）融合蛋白。方法 采用PCR技术分别克隆CTxB基因和141bp的Eg95基因片段序列Eg95（TP）并鉴定。分别将两个基因片段定向克隆到大肠杆菌表达载体pET28a（＋）中,构建pET-CTxB-Eg95（TP）重组质粒。将鉴定为阳性的重组质粒转化E.coliBL21（DE3）感受态细胞,经IPTG诱导后,进行SDS-PAGE电泳鉴定。结果 测序结果 表明已成功构建CTxB-Eg95（TP）融合基因的原核表达载体,SDS-PAGE电泳结果 显示,转染pET-CTxB-Eg95（TP）的E.coliBL21（DE3）菌经IPTG诱导可表达大小约23.5kDa的特异蛋白条带,与预期结果 一致。结论 CTxB-Eg95（TP）融合基因获得了高水平的表达,为Eg95的表位研究和应用于口服疫苗奠定了基础。