甲基-β-环糊精对II型肺泡上皮细胞增殖与转分化的影响

目的 观察甲基-β-环糊精（MβCD）破坏脂质微区结构对Ⅱ型肺泡上皮细胞（AEC Ⅱ）增殖、转分化及细胞周期的影响.方法 采用MβCD破坏体外培养的AEC Ⅱ细胞膜脂质微区（MβCD干扰组）,以必需基本培养基（DMEM）作为对照.用血细胞计数器计数培养细胞,四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法检测细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞周期,免疫荧光双标和蛋白质免疫印迹法（Western blotting）检测AEC Ⅱ特异性肺泡表面活性蛋白C（SP-C）及Ⅰ型肺泡上皮细胞（AEC Ⅰ）特异性水通道蛋白5（AQP5）的表达.结果 与对照组比较,MβCD组干扰后24、48、72 h细胞数及增殖能力显著降低[细胞数（×106/rml）：2.74±0.56比8.05±0.92,4.45±0.68比10.52±0.81,7.82±0.59比11.39±0.81;MTT结果（A值）：0.25±0.20比0.45±0.02,0.35±0.03比0.54±0.28,0.48±0.04比0.59±0.05,均P＜0.01＝;MβCD组干扰后24h G0/G1期细胞比例显著增多,S期细胞比例显著减少[G0/G1期：（60.06±1.65）%比（43.43±3.59）%;S期：（16.20±2.17）%比（34.07±2.63）%,均P＜0.05＝;MβCD组干扰后48 h、72 h SP-C蛋白表达明显增多（0.54±0.04比0.47±0.03,0.19±0.03比0.06±0.02）,AQP5蛋白表达明显减少（0.30±0.04比0.43±0.06,0.39±0.04比0.59±0.04,P＜0.05或P＜0.01＝.结论 MβCD破坏体外培养AEC Ⅱ脂质微区结构后,细胞发生G1期阻滞,细胞增殖和转分化受到抑制.