pLXSN-bcr／abl质粒载体的构建及其逆转录病毒的生成

目的：构建bcr／abl融合基因的逆转录病毒载体，通过细胞包装获取高滴度含bcr／abl基因的逆转录病毒。方法：RTPCR法克隆K562细胞bcr／abl基因断裂点DNA片段，构建pLXSNbcr／abl表达载体；阳离子脂质体法将重组体转染EcoPack2TM-293包装细胞，序列测定鉴定病毒并测定病毒滴度。结果：成功构建pLXSNbcr／abl重组体，序列测定与已知相应bcr／abl融合基因序列相同；脂质体法将重组体转染293包装细胞获得携带bcr／abl基因病毒，测滴度为6× 10^5cfu／mL。结论：成功构建pLXSNbcr／abl表达载体，并获得高滴度含bcr／abl融合基因的逆转录病毒。