抗疟原虫单抗 M26-32IgM 的单体化及其免疫学特性研究

目的改造IgM类抗疟原虫单抗M26-32为单体IgM亚单位，胶体金标记天然和改造后两种M26—32用于检测疟原虫抗原。方法复苏培养M26—32杂交瘤细胞，接种BALB／c小鼠，收集含有单抗的腹水，用商品HiTrap IgM HP柱纯化腹水中的IgM抗体，并用L-半胱氨酸裂解IgM类M26—32单抗成单体IgM亚单位。经间接免疫荧光检定两种抗体的效价，并用胶体金标记，分别检测恶性疟原虫和间日疟原虫可溶性抗原。结果接种20只小鼠，共采集约80mL单抗腹水，经HiTrap IgM HP柱纯化，获得了纯度较高的M26—32单抗。经L一半胱氨酸裂解后，Native电泳显示天然IgM被裂解为单体亚单位，IFA结果显示，亚单位M26-32与天然五聚体IgM滴度无差别。经胶体金标记后，两种金标抗体均分别能检测1：100稀释的恶性疟原虫和1：10稀释的间日疟原虫可溶性抗原。结论建立了L-半胱氨酸裂解IgM类M26—32单抗为单体IgM亚单位及其胶体金标记的方法，为利用M26—32进一步制备相应快速诊断工具奠定基础。