Potenciais candidatos a construção de sistemas rápidos, sensíveis e específicos para o diagnóstico da leishmaniose visceral canina

A leishmaniose visceral (LV) e uma doenca grave, de carater sistemico, que pode acometer o homem e animais mamiferos, como os caes domesticos, que sao tidos como os principais reservatorios da parasitose no Brasil. O diagnostico da leishmaniose visceral canina (LVC) conta com o emprego de metodos sorologicos, parasitologicos e moleculares, entretanto, nenhuma das opcoes atualmente disponiveis e adequada para o monitoraramento da doenca, havendo a necessidade de um metodo diagnostico eficiente para caes portadores de LV, bem como para fazer a distincao correta entre caes sintomaticos e assintomaticos. Dessa forma, este estudo teve o objetivo de avaliar o potencial diagnostico sorologico de antigenos recombinantes para a LVC a fim de melhorar a forma de deteccao da doenca no Brasil. Foram realizadas acoes de diagnostico do calazar em bairros do Distrito Tirirical, em Sao Luis-MA, para avaliacao clinica e coleta de sangue dos caes. O sangue coletado foi utilizado para realizacao de hemograma e esfregacos em lâminas de microscopia para o diagnostico de erliquiose canina. As amostras de soro obtidas a partir do sangue, foram inicialmente triadas com kit de ELISA/S7, para constatacao da existencia de caes reagentes e nao regentes para LV, sendo os casos positivos confirmados por exame parasitologico direto. A partir dos resultados da avaliacao clinica e laboratorial, os caes foram classificados em sintomaticos para LV, assintomaticos para LV, sadios ou com outra infeccao. Posteriormente, os grupos de soro foram utilizados para testar o antigeno SLA e sete antigenos recombinantes de Leishmania infantum chagasi, quanto a funcao de marcadores imunologicos para o sorodiagnostico da LVC, por meio da tecnica de ELISA. Foram avaliados clinicamente e obtidas amostras biologicas de um total de 180 caes. Os sinais clinicos predominantes nos animais foram linfadenomegalia (45,55%), presenca de ectoparasitos (41,66%), onicogrifose (30%), pelagem opaca (27,22%), lesao de pele (22,77%), lesao de focinho/orelha (18,33%), alopecia (17,77%) e alteracao no estado nutricional (17,77%). O escore clinico apresentado por cada animal permitiu determinar um ponto de corte >7 para separar os caes com LV dos caes com outra doenca infecciosa. Com a triagem realizada por meio do kit de ELISA/S7, foram detectados anticorpos anti-Leishmania em 48,33% dos caes da area do Distrito Tirirical. Foram identificados, dentre os caes com LV, 26,11% (n=47) como assintomaticos e 22,22% (n=40) como sintomaticos, e entre os nao reagentes para LV, 32,77% (n=59) eram sadios e 18,88% (n=34) tinham outra infeccao (erliquiose canina). Tres antigenos recombinantes apresentaram melhores desempenhos de sensibilidade, especificidade e elevada ou moderada acuracia pelas curvas ROC, obtendo uma precisao diagnostica melhor que o SLA. Os demais antigenos recombinantes avaliados, apesar de reconhecerem os soros de caes sintomaticos e assintomaticos para LV, nao obtiveram resultados superiores ao SLA. Portanto, os ELISAs realizados com os antigenos indicaram tres proteinas como importantes candidatos para a melhoria do diagnostico da LVC, em virtude de seus desempenhos satisfatorios em todos os parâmetros avaliados.