Peripheral blood CD34+ cells : method of purification and ex vivo expansion

L'autogreffe des cellules souches sanguines est une technique actuellement couramment utilisee dans le traitement des leucemies aigues, des myelomes et de certaines tumeurs solides (ovaire et sein). Ces cellules souches sont prelevees par cytapherese, le plus souvent en sortie d'une aplasie succedant a une cure de chimiotherapie, eventuellement apres stimulation par un facteur de croissance. Nous avons etudie le potentiel d'expansion in vitro des cellules CD34+ mobilisees a partir du sang peripherique. Les cellules CD34+ purifiees a l'aide du syteme de selection CellPro (CEPRATE LC CD34 KIT), sont mises en culture en presence de 6 facteurs de croissance (IL1β, IL3, IL6 a 100 U/ml, G-CSF,GM-CSF et Stem cell factor a 10 ng/ml) pour une duree de 4 semaines. Tous les 7 jours, les suspensions cellulaires sont numerees, la richesse en CFU-GM est determinee. Nous avons etudie le pourcentage de cellules exprimant les antigenes CD34, CD33, CD38, HLA-DR, CD45RA et CD45RO. Nos resultats montrent que la technique de selection CellPro permet d'obtenir des cellules CD34+ avec une purete de 92 ± 2,3 % et un rendement de 71 ± 10,7. La majorite des cellules purifiees expriment les antigenes CD33 (57,76 ± 4,16 %) et CD38 (62,2 ± 34 %). Dans ces conditions de culture les cellules nucleees sont multipliees par un facteur 377 en 28 jours. Les nombres absolus de CFU-GM et de CD34 sont multiplies par des facteurs respectifs de 41,2 (a J21 de la culture) et de 10 (a J7 de la culture).