米诺环素对缺氧缺血脑损伤未成熟新生大鼠TLR4、NF—κBp65和TNF—α表达的影响

目的观察米诺环素（Minocycline，MN）对缺氧缺血脑损伤（hypoxic-ischemic brain damage，HIBD）未成熟新生大鼠Toll样受体4（Toll-1ike receptor4，TLR4）、核因子-κB（nuclear factor-kappa B，NF—κB）p65和TNF．仪表达的影响，探索米诺环素脑保护作用机制。方法将160只生后2d（P2）Sprague—Dawley（SD）新生大鼠随机分成正常对照组、假手术组、HIBD组、HIBD加MN组。通过结扎左侧颈总动脉及8％氮氧混合气缺氧4h，制备未成熟新生大鼠缺氧缺血性脑损伤模型。HIBD加MN组大鼠缺氧后予腹腔注射1次MN45mg／kg，HIBD组予腹腔注射等剂量的无菌PBS（pH7．4）。HI后24h、48h、72h取材，Westernblotting检测TLR4、NF．KBp65和TNF—Ot蛋白表达，HI后72h、4周行脑组织HE染色及病理评分，HI后4周行行为学检测。结果HI后72h、4周HIBD加MN组脑组织病理损伤较HIBD组减轻，HIBD加MN组半定量病理评分低于HIBD组，差异有统计学意义（P〈0．05）。Western blotting显示HI后24、48和72hHIBD加MN组TLR4、NF—KBp65和TNF-α的表达低于HIBD组，较正常组及假手术组升高。HI后4周，在悬吊试验及斜坡试验中，HIBD加MN组与正常组、假手术组差异无统计学意义（Jp〉0．05）。旷场试验中，HIBD加MN组与正常组、假手术组对比，差异有统计学意义（P〈0．05）；与HIBD组比较，P=0．375，差异无统计学意义（P〉O．05）。圆筒实验中HIBD加MN组左侧上肢触壁百分比较HIBD组降低（P〈0．05），与正常组、假手术组差异无统计学意义（P〉0．05）；右侧触壁百分比的比较中，HIBD加MN组与正常组、假手术组、HIBD组差异无统计学意义（P〉0．05）。结论米诺环素对缺氧缺血脑损伤近期及远期具有良好的保护作用，其对缺氧缺血脑损伤的保护作用机制可能与抑制TLR4．NF—κBp65-TNF-α信号途径的激活有关。