Polimorfismos genéticos asociados a litiasis biliar desde una perspectiva étnica

INTRODUCCION La litiasis biliar representa una de las mas frecuentes y costosas alteraciones gastroenterologicas en muchos paises (1,2). La prevalencia de esta patologia en poblaciones europeas adultas se situa en el entorno del 15-20% (3). Ademas, la incidencia de litiasis biliar en las sociedades en desarrollo, que previamente no excedian del 5%, han incrementado en las ultimas decadas. Este incremento se atribuye con frecuencia a la introduccion de estilos de vida occidental, que incluyen dietas ricas en carbohidratos (4) y de inactividad fisica (5), que representan factores de riesgo medioambientales para la litiasis biliar. Sin embargo, aunque son importantes los factores medioambientales, la formacion de calculos tiene una base genetica en el ser humano (6). La epidemiologia sugiere que puede haber “genes litogenicos” especificos que esten ampliamente distribuidos en las poblaciones americanas que han podido ser transferidos a la poblacion mestiza contemporanea (descendiente de espanoles u otros europeos, y amerindios). Sin embargo, no hay estudios sistematicos sobre la predisposicion genetica en poblaciones con componente amerindio OBJETIVOS Teniendo en cuanta lo anterior, el presente trabajo se ha desarrollado para lograr los siguientes objetivos: 1. Detectar, si existen, diferencias entre la poblacion espanola del noreste de la Peninsula Iberica y otra poblacion mestiza de Ecuador en la prevalencia de las siguientes variantes alelicas: rs9514089 (SCL10A2); rs4149056 y rs11045819 (SLCO1B1); rs11887534 (ABCG8); rs3762108, rs56163822 y rs7138843 (NR1H4_1); rs4148323, rs8175347 y rs6742078 (UGT1A1). 2. Establecer la prevalencia del haplotipo NR1H4_1 en las poblaciones espanola y ecuatoriana mestiza. 3. Comparar las frecuencias de las variantes alelicas determinadas en este trabajo con las de otras poblaciones del resto del mundo que se hayan descrito previamente. MATERIAL Y METODOS La poblacion del estudio estuvo constituida por un total de 579 individuos sanos y no emparentados. De ellos, 282 fueron blancos caucasianos del Noreste de Espana (Aragon) (137 hombres y 145 mujeres) y 297 (147 hombres y 150 mujeres) fueron individuos mestizos de Ecuador. Las medias (y rangos) de edad en anos de los participantes fueron 27.5 (18-48) anos y 26.5 (18-52) anos para espanoles y ecuatorianos, respectivamente. Con esta muestra se procedio al estudio de las variantes alelicas de Nr1H4, SCL10A2, ABCG8, UGT1A1 y SLCO1B1. Todos los participantes incluidos de Ecuador fueron Mestizos (descendientes de europeos y amerindios). La naturaleza mestiza se establecio mediante observacion de los rasgos morfologicos, autoidentificacion y genotipado con un panel de marcadores informativos de ancestro. Para ello se utilizo el AIM (Power PlexR 16 system kit, Promega Company. Madison. WI. USA). Los individuos fueron seleccionados al azar entre estudiantes y personal de la Facultad de Medicina de Zaragoza (Zaragoza, Espana) y los de Ecuador, del Hospital Metropolitano y Facultad de Medicina de Quito, Ecuador. Todos los individuos fueron sanos, de acuerdo con la historia clinica y examen fisico. Todos los sujetos dieron su consentimiento informado por escrito para participar en este estudio, que fue aprobado por el Comite Etico de Investigacion Clinica de Aragon (CEICA) (Zaragoza, Espana) y se condujo de acuerdo con la declaracion de Helsinki y sus revisiones subsiguientes. RESULTADOS Y CONCLUSIONES En primer lugar, se determino si las frecuencias genotipicas de los individuos se encontraban en situacion de equilibrio, de acuerdo con la ley de Hardy-Weinberg. Esto se realizo por medio de la comparacion de las distintas frecuencias genotipicas observadas con los valores esperados mediante una tabla de contingencia ?2 . Las diferencias de las frecuencias genotipicas y alelicas entre las distintas poblaciones fueron determinadas mediante contraste de proporciones con dos grados de libertad o un grado de libertad, respectivamente. El programa estadistico utilizado fue MedCalc version 11.3.1.0 (http://www.medcalc.be). El analisis de desequilibrio de ligamiento entre alelos se realizo con el programa Haploview 4.2 (http:/www.broadinstitute.org/haploview/haploview). Los contrastes en los que los valores de probabilidad de error tipo I resultaron ser menores de 0,05 fueron considerados estadisticamente significativos para el rechazo de la hipotesis nula. Las principales conclusiones que pueden extraerse del presente trabajo son las siguientes: 1. La frecuencia de la variante alelica G del rs9514089, asociada en estudios epidemiologicos, con aumento de riesgo de padecer litiasis biliar, es similar en espanoles y ecuatorianos mestizos. La comparacion interetnica de la prevalencia de este alelo muestra la similitud de estas dos poblaciones con otras caucasicas y asiaticas, y la superior presencia del alelo en poblacion africana y finlandesa. 2. En la poblacion espanola, la frecuencia del alelo C del rs4149056 del gen SLCO1B1, que produce un cambio missense en la codificacion del transportador, es similar a la que presentan otras poblaciones caucasicas y asiaticas. Este alelo mutado esta menos presente en espanoles que en ecuatorianos mestizos que junto a colombianos y finlandeses presentan la mayor prevalencia a nivel global. 3. El alelo A del rs11045819 del gen SLCO1B1, que genera un cambio de aminoacido missense, presenta una prevalencia similar en espanoles y ecuatorianos mestizos. En poblaciones asiaticas este alelo esta ausente y la mas alta presencia se presenta en africanos. 4. El rs11887534 del gen ABCG8, perteneciente al complejo proteico ATP-bindingcassette, presenta una similar distribucion alelica entre espanoles y ecuatorianos mestizos, encontrandose la menor presencia en asiaticos. 5. La variante mutada G del rs3762108 del gen NR1H4, codificante del receptor X farsenoide (FRX), asociada con mayor riesgo de colelitiasis es estudios epidemiologicos, esta mas presente en ecuatorianos mestizos respecto a espanoles. La frecuencia alelica del rs3762108 en la poblacion ecuatoriana mestiza, dispone de una representacion similar a otras poblaciones americanas, ocupando una posicion intermedia entre caucasicos y poblacion asiatica y nigeriana, donde resulta ser mas prevalente. 6. El rs56163822 perteneciente al gen NR1H4, asociado epidemiologicamente a riesgo de colelitiasis, esta escasamente presente en ambas poblaciones estudiadas destacando, la ausencia de homocigotos para el alelo mutado T en ambas poblaciones. Ademas, este alelo ha sido menos prevalente que en asiaticos y mejicanos. 7. La variante T del rs7138843 del gen NR1H4, asociado a un superior riesgo de padecer colelitiasis, esta menos presente es espanoles que en ecuatorianos mestizos, sin que se hayan encontrado individuos homocigotos TT. La presencia del alelo T del rs7138843 en ecuatorianos mestizos ocupa una posicion intermedia entre la de caucasicos, cuya prevalencia es menor, y asiaticos y nigerianos. 8. Los tres SNPs estudiados del gen NR1H4 han resultado en desequilibrio de ligamiento en las dos poblaciones estudiadas formando el haplotipo NR1H4_1, previamente hallado asociado a riesgo de padecer colelitiasis, siendo el gradiente: caucasicos > chilenos > ecuatorianos mestizos y mejicanos. 9. El alelo mutado A del rs4148323 (UGT1A1), que conlleva actividad enzimatica reducida, es practicamente inexistente en la poblacion espanola e inferior a la ecuatoriana mestiza, con ausencia en las dos poblaciones de individuos homocigotos AA. En la poblacion espanola la frecuencia es similar a la de otras poblaciones caucasianas e inferior a poblaciones americanas y asiaticas. 10. La distribucion de frecuencias del alelo del rs6742078 del gen UGT1A1 es similar en poblacion espanola y ecuatoriana mestiza. En estas poblaciones, la prevalencia del alelo mutado T, asociado previamente a un aumento de bilirrubina a nivel plasmatico, se encuentra entre la de asiaticos, donde es menor y africanos de Nigeria. 11. El rs8175347 de la isoenzima UGT1A1 muestra una frecuencia similar en espanoles y ecuatorianos mestizos. En esta poblaciones, la presencia del alelo mutado (TA)7, asociado a un descenso de actividad enzimatica, es mas prevalente que en asiaticos y menos que en africanos. 12. No existen diferencias de genero en la frecuencia de ninguna de las variantes alelicas analizadas en este estudio.