谷氨酰胺对斜带石斑鱼GF-1细胞中C-Myc蛋白的表达与神经坏死病毒复制的影响

为探讨C-Myc表达、谷氨酰胺代谢和神经坏死病毒复制三者之间的关系，本研究首先克隆了斜带石斑鱼鳍条细胞(GF-1)中的C-Myc基因(GF-1-C-Myc)，结果显示GF-1-C-Myc基因cDNA全长814 bp，开放阅读框(ORF)为285 bp，编码95个氨基酸(aa)，有亮氨酸拉链结构域与螺旋－环－螺旋(HLH)结构域。实验表达和纯化了GF-1-C-Myc蛋白，并制备其多克隆抗体。采用实时定量PCR技术(qRT-PCR)与免疫印迹法(WB)检测了GF-1-C-Myc基因的表达和神经坏死病毒的复制。结果显示，缺乏谷氨酰胺会同时抑制GF-1-C-Myc基因的表达和神经坏死病毒(NNV)的复制，添加谷氨酰胺可同时促进GF-1-C-Myc的表达和NNV的复制；此外，NNV感染可上调GF-1-C-Myc基因的表达，并显著消耗GF-1细胞培养液中的谷氨酰胺。研究表明，GF-1-C-Myc基因可调控宿主谷氨酰胺代谢，从而有利于神经坏死病毒的复制。本结果为防控NNV的感染提供了参考。