Febre maculosa brasileira: avaliação comparativa das metodologias de imunofluorescência indireta (IFI) e reação em cadeia pela polimerase (PCR) em amostras de pacientes provenientes de áreas endêmicas do Estado de São Paulo

As aplicacoes da reacao em cadeia pela polimerase (Nested PCR) foram avaliadas em comparacao com a pesquisa de anticorpos e isolamento bacteriano, para o diagnostico de casos fatais com suspeita de riquetsioses do Grupo da Febre Maculosa (GFM) em amostras de soro. A PCR foi baseada na especificidade dos iniciadores derivados de uma regiao genica conservada que codifica um antigeno de 17-kDa (htrA). Amostras de soro de 50 casos fatais suspeitos de riquetsioses do GFM foram testadas atraves da Imunofluorescencia Indireta (IFI) para pesquisa de IgG e IgM e Nested PCR apos extracao do DNA com kit especifico para extracao de soro. O isolamento bacteriano foi realizado quando foram encaminhadas amostras adequadas para o exame. O fragmento especifico de riquetsias GFM foi detectado em 40% (20/50) dos soros testados em comparacao com 22% (11/50) detectados pelos metodos sorologia e isolamento bacteriano. Os produtos amplificados foram confirmados pela analise do sequenciamento de fragmentos de DNA apresentando 100% de identidade com R. rickettsii e com Grupo da Febre Maculosa. Os resultados obtidos indicam que a utilizacao da Nested PCR em amostras de soro aumenta a sensibilidade para o diagnostico da FM em casos fatais com suspeita clinica da doenca, sendo indicada sua aplicacao em complemento a sorologia e ao isolamento.