Isolierung von pathogenetisch spezifischen Gensequenzen aus synovialen Fibroblasten von Patienten mit rheumatoider Arthritis

Ziel der vorliegenden Arbeit war die Identifizierung von Genen und Genprodukten, die fur die Pathophysiologie der rheumatoiden Arthritis von Bedeutung sind. Es wurde eine Vielfalt an Methoden etabliert oder neu entwickelt, die es gestatten, RA-spezifische Unterschiede zu identifizieren. Mittels RAP-PCR wurden differentiell exprimierte Gene identifiziert, die Bestatigung erfolgte sodann sowohl auf RNA- als auch auf Proteinebene. Um einen noch besseren Einblick zu erhalten, wurde die Kombination von Lasermikrodissektion und RAP-PCR fur unsere Proben etabliert. Eine Eigenheit synovialer RA-Fibroblasten sind die oft deutlichen interindividuellen Unterschiede in der Genexpression. Es ist somit notwendig, eine moglichst grosse Anzahl verschiedener Patientenproben auf die Expression moglichst vieler potentiell bedeutsamer Gene zu untersuchen. Um eine hierfur besser geeignete Methode zu etablieren, wurde mit der Entwicklung der RAP-PCR-Mikroarrays begonnen. Fur die mit Hilfe der RAP-PCR als differentiell exprimiert identifizierten Gene CENP-E und SDF1 bestehen Hinweise, die deren vermehrte Expression als relevant fur die Pathophysiologie der rheumatoiden Arthritis erscheinen lassen. SDF1 wirkt nicht nur chemotaktisch auf verschiedenste Zellen des Immunsystems, weiterhin exprimieren auch synoviale Fibroblasten den SDF1-Rezeptor CXCR4 und zeigen deutliches chemotaktisches Verhalten, was eine Relevanz sehr wahrscheinlich erscheinen lasst. Die Herunterregulierung sowohl des Chemokins als auch seines Rezeptors durch Steroide kann deren antiinflammatorische Wirkung mit erklaren.. P53-Mutationen spielen wohl keine substantielle Rolle bei der Pathogenese der rheumatoiden Arthritis. Zusammenfassend wurde mit der vorliegenden Arbeit erstmals eine zuverlassige Strategie etabliert, mit der bei multifaktoriellen nichtmalignen Erkrankungen wie der RA auch feine Unterschiede in der Genexpression identifiziert werden konnen.