EL USO DE DIFERENTES VOLÚMENES DE SEMEN EN EL TEST HIPOSMÓTICO EN TOROS ADULTOS DE LA RAZA NELORE

El objetivo de este estudio ha sido evaluar diferentes proporciones de semen: solucion hiposmotica en la realizacion del test hiposmotico y sus relaciones con la congelabilidad del semen de toros cebu. Se utilizaron 15 eyaculados de tres toros adultos de la raza Nelore. En el semen fresco se realizo evaluacion fisica y morfologica, la tincion supravital y test hiposmotico. En el test hiposmotico se ha utilizado una solucion con osmolaridad de 100 mOsm/kg con un periodo de incubacion de 15 minutos a 37 oC, tanto en el semen fresco cuanto en el congelado/descongelado. Fueron utilizados cuatro volumenes de 1 mL de solucion hiposmotica: 10, 20, 50, y 100 µL. Las muestras criopreservadas fueron descongeladas y realizados los tests hiposmotico, tincion supravital, test de resistencia al fuego lento y la tincion fluorescente. Los valores medios y desvio estandar del porcentaje de espermatozoides reactivos al test hiposmotico en l semen fresco y congelado/descongelado fueron 69,3 ± 11,8 y 20,5 ± 6,8; respectivamente. No hubo correlacion del test hiposmotico con las caracteristicas fisicas y morfologicas y pruebas adicionales en el semen fresco y congelado/descongelado. Ningun test de integridad de la membrana plasmatica de los espermatozoides han sido capaz de clasificar a los toros cuanto su congelabilidad del semen. Se puede concluir que el test hiposmotico puede ser realizado con 20 a 100 µL de semen fresco, y de 10 a 100 µL de semen congelado/descongelado en 1 mL de solucion hiposmotica, sin interferir en sus resultados, pero se debe optar por 100 µL para el semen fresco y congelado/descongelado, porque mejora significativamente la lectura de las laminas. O objetivo deste estudo foi avaliar diferentes proporcoes de semen: solucao hiposmotica na realizacao do teste hiposmotico e suas relacoes com a congelabilidade do semen de touros zebuinos. Utilizaram-se 15 ejaculados de tres touros adultos da raca Nelore. No semen in natura realizou-se a avaliacao fisica e morfologica, a coloracao supravital e o teste hiposmotico. No teste hiposmotico foi utilizada uma solucao com osmolaridade de 100 mOsm/Kg com 15 minutos de periodo de incubacao a 37 oC, tanto no semen in natura quanto no congelado/descongelado. Foram utilizados quatro volumes de semen em 1mL de solucao hiposmotica: 10, 20, 50 e 100 µL. As amostras criopreservadas foram descongeladas e foram realizados os testes hiposmotico, coloracao supravital, teste de termo-resistencia lento e a coloracao fluorescente. Os valores medios e desvios padrao do percentual de espermatozoides reativos ao teste hiposmotico em semen in natura e congelado/descongelado foram 69,3 ± 11,8 e 20,5 ± 6,8; respectivamente. Nao houve correlacao do teste hiposmotico com os aspectos fisicos e morfologicos e os testes complementares realizados em semen in natura e congelado/descongelado. Nenhum teste de integridade de membrana plasmatica dos espermatozoides foi capaz de classificar os touros quanto a sua congelabilidade do semen. Conclui-se que o teste hiposmotico pode ser realizado com 20 a 100 µL de semen in natura, e 10 a 100 µL de semen congelado/descongelado em 1 mL de solucao hiposmotica, sem interferir em seus resultados, mas deve-se optar por 100 µL tanto para semen in natura e congelado/descongelado, porque melhora consideravelmente a leitura das lâminas. The objective of this study was to evaluate different proportions of semen: hypoosmotic solution in the hypoosmotic swelling test and their relationship with semen freezability in Zebu bulls. A total of 15 ejaculates from three adult Nelore bulls were used. Physical and morphological features were analyzed in fresh semen, as well as supravital staining and hypoosmotic swelling test. In the hypoosmotic test, a hypoosmotic solution with 100 mOsm/kg osmolality using 15 minutes incubation at 37 °C was used both in fresh and frozen/thawed semen. Four semen volumes in 1-ml hyposmotic solution were used: 10, 20, 50 and 100 µL. Cryopreserved samples were thawed and submitted to hypoosmotic tests, supravital staining, slow thermo-resistance test and fluorescent staining. Mean values and standard deviations of the percentage of reactive sperm cells in the hypoosmotic test in fresh and frozen/thawed semen were 69.3 ± 11.8 and 20.5 ± 6.8, respectively. There was no correlation between the hypoosmotic test and physical and morphological features and the complementary tests performed on fresh and frozen/thawed semen. None of the plasma membrane integrity tests was able to predict bull semen freezability. It can be concluded that the hypoosmotic test can be performed with 20 to 100 µL fresh semen, and 10 to 100 µL of frozen/thawed semen in 1 mL of hypoosmotic solution without interfering with their results, but 100 µL should be used in both, because it considerably improves the view of the slides.