Expression of retinoidacid receptors in human scleral fibroblasts and regulation of growth of fibroblasts byretinoic acid

目的 研究正常人眼巩膜成纤维细胞视黄酸受体亚型的表达,进一步研究视黄酸对人巩膜成纤维细胞的生长调控作用,从而阐明其和近视发生发展的关系.方法应用定点解剖及游走促进法分离培养人巩膜成纤维细胞,取3～5代生长良好的细胞,运用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测培养的巩膜成纤维细胞视黄酸受体亚型的表达;在培养液中分别加入0.01、0.10、1.00、10.00和100.00nmol/L的视黄酸,6 d后进行细胞计数.每株细胞重复3次,共用3株细胞,观察视黄酸对巩膜成纤维细胞的生长调控作用.结果培养的巩膜成纤维细胞呈双极型或纺锤型,平均分裂时间为2～3 d左右,细胞生长旺盛,近融合时细胞成规则排列的纺锤型.RT-PCR提示体外培养的人巩膜成纤维细胞表达所有的视黄酸受体亚型.视黄酸能明显抑制人巩膜成纤维细胞的生长,对细胞生长的抑制作用呈明显的剂量效应关系,RA浓度≥0.10nmol/L时,与无RA的对照组相比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论所有的视黄酸受体亚型在人巩膜成纤维细胞上均有分布,视黄酸能明显抑制人巩膜成纤维细胞的生长。