Let-7d通过靶向调控Rhotekin基因抑制骨肉瘤细胞的增殖、迁移和侵袭

目的探讨let-7d在骨肉瘤组织中的表达，并研究let-7d及其靶基因对人骨肉瘤细胞U2OS增殖、迁移和侵袭的影响。 方法收集2010年至2015年于我科行手术切除的25例骨肉瘤患者的肿瘤组织和癌旁组织（距肿瘤组织边缘>5 cm），并用qPCR检测let-7d的表达情况。构建稳定过表达let-7d的U2OS细胞，用qPCR验证let-7d过表达情况，以转染pCDH空病毒载体的U2OS细胞作为对照组细胞，并分别采用CCK-8实验、划痕实验和Transwell实验检测过表达let-7d对U2OS细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。通过微RNA靶基因预测软件和双荧光素酶实验明确let-7d的下游靶基因，检测过表达let-7d的U2OS细胞中靶基因的表达水平，并通过小干扰RNA技术研究抑制靶基因表达对U2OS细胞增殖、迁移和侵袭的影响。 结果骨肉瘤组织中let-7d表达水平低于癌旁组织（ P P P 均 RTKN ）基因是let-7d的直接靶基因，且过表达let-7d导致U2OS细胞中 RTKN mRNA表达水平较对照组降低（ P RTKN 表达能抑制U2OS细胞增殖、迁移和侵袭（ P 均 结论Let-7d通过靶向调控RTKN抑制骨肉瘤细胞的增殖、迁移和侵袭，可作为骨肉瘤治疗一个新的靶点。