健脾方对克罗恩大鼠结肠NF-κBP65、IL-23和CCL20及其受体表达的影响
2016
目的:观察核因子NF-κB p65信号通路介导细胞因子IL-23、趋化因子巨噬细胞炎症蛋白-3α(CCL20)及其受体CCR6表达的影响,及健脾方防治三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的克罗恩病中相关作用机制。方法:24只清洁级雄性SD大鼠随机分为:1正常对照组(NG,n=8):从造模第2周起双蒸水灌胃,每日1次,灌胃量按0.1 m L·kg^-1,共3周;2 TNBS模型组(MG,n=8):从第1周开始TNBS灌肠,灌肠剂量(m L)=体质量(g)×0.003 ml·g^-1,每周1次,造模持续共4周;3模型+健脾方防治组(JP,n=8):从造模第2周开始,在TNBS灌肠后的第2天予以中药健脾方灌胃治疗,灌胃量按0.1 m L·kg^-1,每日1次,灌胃持续3周;采用结肠组织学损伤评分及HE组织病理的方法观察健脾方的疗效,免疫荧光、ELISA、原位杂交等技术观察各组大鼠结肠黏膜中NF-κB P65、IL-23、CCL20、CCR6蛋白与基因的表达差异;结果:免疫荧光和原位杂交结果显示,CCL20及其受体CCR6在正常组大鼠结肠中呈低表达,在模型组中呈高表达状态(P〈0.05)。健脾方可显著降低大鼠结肠趋化因子CCL20及其受体CCR6的表达水平(P〈0.05)。正常组大鼠结肠中NF-κB P65呈低表达,在模型组中呈高表达状态(P〈0.05),健脾方可显著降低大鼠结肠NF-κB P65表达水平(P〈0.05)。ELISA结果显示IL-23在正常组大鼠结肠中呈低表达,在模型组中呈高表达状态(P〈0.05)。健脾方可显著降低大鼠结肠细胞因子IL-23的表达水平(P〈0.05)。结论:健脾方可减轻TNBS诱导的CD大鼠结肠炎症程度,其潜在的机制与抑制NF-κB P65、IL-23和CCL20/CCR6的表达有关。
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