Heterologous gene expression driven by carbonic anhydrase gene promoter in Dunaliella salina
2006
Dunaliella 盐咸滩,一个光圈没有一面僵硬房间墙的容忍的单细胞的绿水藻,能住在从 0.05 ~ 5 mol/L NaCl 的咸度。这些特征 ofD。盐咸滩为抗体的生产使它成为一位理想的主人,口头的疫苗,;商业地珍贵的多肽。生产 heterologous 蛋白质 fromD 的高水平。盐咸滩,高度有效的倡导者被要求在控制状况下面驾驶目标基因的表示。在现在的学习,我们从碳的 anhydrase (CAH ) 克隆 1.4 kb 的 5 ′ franking 区域基因 ofD。由 genomic 走的盐咸滩;PCR。碎片被绑扎到 pMD18-T 向量;描绘。顺序分析显示这个区域包含了保存主题,包括一个 TATA- 相似盒子;CAAT 盒子。有 transcriptional 的一个潜在的角色的双人脚踏车(GT ) n 重复控制,也在这个区域被发现。theCAH 基因的抄写开始地点(TSS ) 被 5 ′种族决定;嵌套的 PCR 方法。转变试金证明 1.4 kb 碎片能驾驶可选的工具条(bialaphos 抵抗) 的表示基因当熔化在狐被转变时。由 biolistics 的盐咸滩。北弄污杂交证明酒吧抄本很充满在 2 mol/L NaCl 种的房间,;不太充满 0.5 mol/L NaCl,显示酒吧基因的那表情在高咸度被导致。这些结果建议 theCAH 基因倡导者的潜在的使用导致 heterologous 基因 inD 的表示。在改变的盐状况下面的盐咸滩。
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