朗德鹅肌肉生成抑制因子基因（MSTN）的克隆及其表达量与日粮能量、血清IGF-I和GH的关系

【目的】采用反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）技术，克隆朗德鹅肌肉生成抑制因子基因（MSTN），研究MSTN基因表达和日粮能量及其部分血清激素含量的相互关系，了解MSTN的功能，为水禽分子营养和分子育种提供基础资料。【方法】从朗德鹅（Anser anser）的腿肌中抽提总RNA，用两步法RT—PCR扩增出MSTN基因的cDNA编码序列，以pGEM—T Vector为载体，将该片段克隆到大肠杆菌（Escherichia coli）中。通过筛选阳性克隆，双酶切鉴定后测序；以MSTN基因的克隆为基础，以β—actin为内标，构建优化的半定量RT-PCR方法，研究高中低（A：13．38MJ·kg^-1、B：12．13MJ·kg^-1、C：10．87MJ·kg^-1）3种不同能量对朗德鹅21日龄和70日龄2个时期，肌肉组织MSTN基因表达的差异；同时用放免法测定21、70日龄的血清GH和IGF-I浓度。【结果】克隆朗德鹅MSTN基因eDNA的部分序列，其片段大小为1128bp，编码375个氨基酸组成的多肽，与已发表的鸡、鸭、鹅的MSTN核苷酸相似性分别为94％、94％、99％；氨基酸的相似性分别为98％、97％、98％；21日龄时，朗德鹅公鹅、母鹅MSTN表达量差异不显著；70日龄时朗德鹅公鹅MSTN的表达量情况为能量A〉C〉B，朗德鹅母鹅MSTN的表达量情况为C〉B〉A；对于朗德鹅21～70日龄阶段的生长，MSTN基因的表达量和血清IGF-I的变化基本一致；与血清GH含量之间并不存在很大关联，GH和能量的高低呈正相关。【结论】日粮能量对21日龄后朗德鹅MSTN基因的表达有影响，且MSTN基因表达量和血清IGF-I具有相关性，和血清GH无较大相关性。