流式细胞术检测RhD（-）血液中微量RhD（＋）红细胞的研究

目的探讨建立流式细胞术（FCM）检测微量RhD（＋）红细胞的试验方法。方法选取标准的RhD（＋）和RhD（-）细胞按不同比例混合，用间接标记法-抗为IgG抗-D，二抗为FITC-抗-IgGF（ab’）2染色，应用FCM检测RhD（＋）细胞的比例，并确立IgG抗-D的最佳使用剂量。在此实验条件下，作FCM检测值与实际值的相关性分析和FCM的检测重复性分析。结果抗-D的最佳使用剂量是1：4稀释，50μl/1×10^5细胞；当RhD（＋）细胞占RhD（-）细胞比例范围为2.5％-0.312％时，FCM测定比例与已知实际比例的相关系数（r）=0.987。RhD（＋）细胞比例分别为10％、2.5％的同一测定管各重复测定10次，变异系数分别3．4％、4．9％。结论FCM检测微量RhD（＋）细胞具有较好的准确度和重复性，可应用于检测RHD（-）患者体内的微量RhD（＋）细胞。