依达拉奉对Aβ_（25-35）诱导的PC12细胞MAPKs信号通路的影响

目的探讨自由基清除剂依达拉奉通过丝裂原活化蛋白激酶（MAPKs）信号转导通路发挥细胞保护作用的途径,为阿尔茨海默病（AD）发病机制及AD治疗新药的研发增添理论依据。方法培养肾上腺嗜铬瘤细胞（PC12细胞）,根据不同的干预措施将细胞分为4组。阴性对照组（高糖DMEM组）;AD模型组（30μmol/L Aβ25-35处理组）;抑制剂对照组：10μmol/L SB203580〔丝裂原活化蛋白激酶p38（p38）抑制剂〕、10μmol/L SP600125〔c-Jun氨基末端激酶（JNK）抑制剂〕或10μmol/L PD98059〔细胞外调节蛋白激酶（ERK）抑制剂〕处理组;依达拉奉低、中、高剂量组：依达拉奉20、40、80μmol/L及30μmol/L Aβ25-35共同孵育组。Western blot检测各组细胞p-p38、p-JNK及p-ERK蛋白的表达;RT-PCR法检测以上各组（抑制剂对照组仅加入SB203580 10μmol/L）p38 mRNA的表达。结果 1与阴性对照组比,AD模型组p-p38蛋白表达增高（P〈0.01）;与AD模型组比,抑制剂对照组和依达拉奉各组p-p38蛋白的表达减低（P〈0.05）;依达拉奉3组的p-p38蛋白表达高于抑制剂对照组（P〈0.05）,与低剂量依达拉奉组比,中剂量依达拉奉组p-p38蛋白有所减低（P〈0.05）。2与阴性对照组比,AD模型组p-JNK蛋白表达增高（P〈0.05）;与AD模型组比,抑制剂对照组p-JNK蛋白的表达减低（P〈0.05）。3 pERK表达在各组之间差异无统计学意义（P〉0.05）。4与阴性对照组比,AD模型组的p38mRNA表达增加,而抑制剂对照组的p38mRNA表达减少（分别P〈0.05）;中、高剂量依达拉奉组p38mRNA表达比AD模型组减低,且比抑制剂对照组还低（P〈0.05）;以40μmol/L依达拉奉组p38mRNA表达最低,与20μmol/L、80μmol/L依达拉奉组均明显不同（P〈0.05）。结论 Aβ25-35可能直接激活MAPK信号通路,尤其p38及JNK,损伤PC12细胞。依达拉奉可能同时在mRNA水平及蛋白质水平,阻断p38信号转导通路,发挥抗Aβ25-35引起的PC12细胞损�