假俭草(Eremochloa ophiuroides (Munro.) Hack)的高效组织培养再生体系 的建立

本研究以假俭草 ( Eremochloa ophiuroides (Munro.) Hack) 为材料，探讨了不同外植体、基本培养基类型、外源激素与固化剂种类对愈伤组织诱导的影响，并进行了三种不同外观状态的愈伤组织体细胞胚胎发生和内源激素含量测定及乙烯发生抑制剂对愈伤组织分化长芽的影响研究。结果表明：含低浓度 2,4 - D 的培养基上萌发的芽尖作外植体，诱导效果最佳； 2,4 - D 进行愈伤组织诱导的最佳浓度为 3.5 mg / L ；基本培养基诱导率以 N6 最高； Phytagel 与 Agarose 为效果最优的固化剂。体细胞胚胎研究表明初代淡黄色松软愈伤组织，其核小或无明显细胞核，以非胚性化细胞为主；部分区域开始呈现胚性愈伤组织，核大，胞质较浓，胚性化特征明显。内源激素测定赤霉素 (GA 3 ) 只存在非胚性愈伤组织 (non-embryonic callus, NEC) 中；生长激素 (IAA) 只存在胚性愈伤组织 (embryonic callus, EC) ；细胞分裂素 (ZT) 含量在三类愈伤组织中都较低。分化结果表明， 1~5 mg / L 的 CoCl 2 和 5~30 mg / L 的 AgNO 3 能提高假俭草愈伤组织分化长芽率，生根壮苗则在 1 / 2MS 垣 NAA0.5 mg / L 易于长根。本研究通过建立详细的假俭草高效组织培养再生体系，为其后续转基因分子育种及用 CRISPR 研究其基因功能打下基础。