Molecular identification of the human/goat xenogeneic model

目的使用分子生物学技术对人/山羊造血干细胞嵌合模型进行检测.方法从11只胚胎期移植了人造血干细胞的山羊外周血中分别抽提DNA和总RNA,然后分别对11只山羊DNA进行人CD34基因、GPA基因、SRY基因的PCR扩增,对其中5只山羊的人CD34基因及另6只山羊的GPA基因表达进行了RT-PCR检测,并用人α-微卫星序列片段作为探针对8只实验山羊DNA进行了Southern blot杂交,同时还用人Y染色体探针进行荧光原位杂交(FISH).结果经PCR检测,所有11只实验山羊的DNA中均可扩增出人CD34基因和GPA基因,5只实验山羊的DNA中可扩增出人SRY基因.Southern blot、RT-PCR和FISH的结果亦均显示阳性.结论通过分子检测证实人造血干细胞已在山羊体内存活.用该方法对人/山羊造血干细胞嵌合模型进行检测是可行的.