四环素与 3, 4- 苯并芘复合污染对抗性基因 tetA(C) 产生高抗性突变的影响

目的探究环境中同时存在低浓度四环素（tetracycline，TC）和3，4-苯并芘（benzo [a] pyrene，Bap）对抗性基因tetA（C）产生高抗性突变的影响。 方法以大肠杆菌（Escherichia coli，E.coli）为宿主菌株，pACYC184质粒作为载体，四环素抗性基因tetA（C）作为研究对象，采用易错PCR构建基因文库的方法，建立基因突变位点对应高抗性的关系密码表。同时设置添加低浓度TC且添加0-30 mg/L Bap以及仅添加0-30 mg/L Bap的处理组，培养携带pACYC184质粒的大肠杆菌14 d，每组中随机挑选10株获得高抗性的菌株，对其中的tetA（C）基因片段进行测序，再结合突变位点密码表，计算高抗性菌株中由基因突变产生高抗性菌株的比例。 结果测序结果显示在低浓度TC选择压力下，Bap浓度越高时，高抗性基因突变株占的比例也越高（P ≤ 0.01），而不添加TC时，Bap浓度与高抗性基因突变株占比之间无变化规律（P>0.05）。 结论当环境中同时存在Bap和低浓度TC时，高抗性突变基因易于通过选择压力保存下来。