嵌合HAdV六邻体蛋白抗原表位的rFLU/HAdV/Hexon疫苗候选株构建及免疫效果研究

目的构建、拯救以PR8流感病毒为载体嵌合HAdV六邻体蛋白抗原表位的疫苗候选株，对其免疫原性及免疫保护性进行评价。方法应用反向遗传学技术，以流感病毒PR8为载体，将HAdV六邻体蛋白抗原表位的基因插入流感病毒非结构蛋白NS基因，构建重组质粒NSl-Hexon，将重组质粒与PR8流感病毒其他7个基因组质粒共转染COS-1／MDCK共培养细胞，成功拯救嵌合HAdV六邻体抗原表位重组疫苗候选株，命名为rFLU／HAdV／Hexon，通过HA、RT-PCR、IFA、Western blotting和电镜等方法对rFLU／HAdV／Hexon进行鉴定。rFLU／HAdV／Hexon经鸡胚培养、浓缩纯化后滴鼻免疫Balb／c小鼠，评价小鼠机体产生的体液免疫、细胞免疫和黏膜免疫应答．进一步采用PR8流感病毒和HAdV-3病毒攻击小鼠评价其免疫保护性。结果成功拯救出基于PR8流感病毒为载体嵌合HAdV六邻体蛋白抗原表位的rFLU／HAdv／Hexon疫苗候选株。rFLU／HAdV／Hexon疫苗株形态符合流感病毒典型特征，能够诱导小鼠机体产生高效价的针对PR8和HAdV-3的特异性抗体，肺鼻灌洗液可检测到高效价的sIgA抗体；攻毒实验结果显示，rFLU／HAdV／Hexon疫苗株免疫小鼠可明显减轻感染症状、有效降低肺鼻的病毒载量、显著改善肺组织的病理病变情况。结论研制的嵌合HAdV六邻体蛋白抗原表位的rFLU／HAdV／Hexon疫苗株是有发展前景的腺病毒候选疫苗株，为腺病毒疫苗的研究提供了新思路。