Apports de la cytométrie en flux dans l'étude des radicaux libres : Les radicaux libres

Trois fluorochromes ont ete utilises au cours de l'etude du metabolisme oxydatif des polynucleaires neutrophiles (PN) par cytometrie en flux (CMF) : Dihydrorhodamine 123 (DHR 123), Dichlorofluorescine (DCFH) et hydroethidine (HE). Ces sondes fluorogenes deviennent fluorescentes apres oxydation intracellulaire, en presence de radicaux libres. Les reponses les plus sensibles ont ete obtenues avec la DHR et le DCFH. Nous presentons ici les resultats obtenus avec des PN de sujets sains artificiellement par du phorbol-myristate-acetate (PMA) et les resultats obtenus avec des PN de sujets soumis a 10 seances d'oxygenotherapie hyperbare (OHB). Pour ces patients, les resultats preliminaires montrent une stimulation de la production de radicaux libres au cours de la premiere seance mise en evidence en CMF par une fluorescence significativement augmentee (p < 0,05) apres caisson. Au cours des seances suivantes, les cellules semblent s'adapter puisqu'aucune difference significative de fluorescence n'est observee avant et apres caisson. De plus, ces cellules soumises a une stimulation artificielle in vitro par du PMA peuvent encore produire des radicaux libres. Neanmoins, apres la 10 e seance d'OHB les PN ne repondent pas a une stimulation au PMA.