细菌脂多糖中GDP-colitose糖合成基因的预测、克隆及表达鉴定

colitose糖存在Salmonella enterica O50、S.enterica O35、E.coli O111、E.coli O55和Vibrio cholerae O139等少数几种细菌的O-抗原中.GDP-colitose糖的合成酶基因分别为wbdJ、wbdK和gmd.用PCR的方法扩增出三种基因的片断,克隆到表达载体pCAL-c中,从而构建了表达质粒pLW1、pLW4、pLW7,转化到大肠杆菌BL21-Gold中,获得工程菌株B10,B11,B12.IPTG诱导表达,纯化得到三种电泳纯的表达产物,分子量分别约为35kD,44kD,42kD,与预测结果相似.