Optimización de la cuantificación de los receptores nucleares para estradiol y progesterona en útero de rata

La cuantificacion de los receptores hormonales empleando hormona radiactiva en neoplasias hormonodependientes regularmente se realiza unicamente en el citosol celular. Esta determinacon es incompleta, ya que la presencia de los receptores localizados en el nucleo no se efectua y, por lo tanto, no se determina la totalidad de los receptores en un tumor. En el presente estudio se otimizo la cuantificacion de los receptores hormonales para estradiol localizados en el nucleo celular, empleando diferentes temperaturas de incubacion con la hormona radiactiva (4,22 y 37 Grados C). Los receptores nucleares se extrajeron de la cromatina con soluciones amortiguadoras de KC1 0.4 M. se emplearon como modelo experimental uteros de ratas Wistar, adrenalectomizadas y ooforectomizadas, las cuales fueron posteriormente estimuladas con estradiol, progesterona y vehiculo de administracion. Se pudo observar que la cuantificacion de los receptores nucleares para estradiol a 22 Grados C detecta un 13 por ciento mas de estas proteinas, sin que se vea afectada por la temperatura la afinidad del receptor por su hormona. El receptor de progesterona no se pudo detectar en el nucleo, ya que al parecer es altamente sensible al KC1. En conclusion, es factible determinar los receptores nucleares para estradiol, empleando incubaciones a 22 Grados C como temperatura optima en el nucleo.(AU)