Mutaciones puntuales en el gen de la dihidropteroato sintetasa de Plasmodium falciparum en Bolívar, Colombia

2013 
Introduccion: la resistencia antimalarica dificulta el control del paludismo en Colombia. La vigilancia molecular de mutaciones puntuales en blancos terapeuticos es fundamental en el estudio de la resistencia a los antimalaricos. Objetivo: identificar mutaciones puntuales en el gen de la dihidropteroato sintetasa de Plasmodium falciparum (pfdhps), asociadas con resistencia in vitro a sulfadoxina. Metodos: la fuente de ADN de Plasmodium falciparum consistio en laminas de gota gruesa de 55 individuos con infeccion malarica, reportados en el departamento de Bolivar, Colombia. El ADN se extrajo con solucion de Chelex-100 al 5 %. Las mutaciones se identificaron mediante PCR-RFLP (polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism) y secuenciacion. Resultados: 17 muestras (31 %) amplificaron un fragmento de 438 pb de pfdhps. La PCR-RFLP mostro frecuencia del genotipo mutante G-437 en 65 % de los amplificados, el mixto A/G-437 en 29 % y el silvestre A-437 en 6 %. Los alelos mutantes G-437, F-436 y el alelo silvestre K-540 se identificaron en todas las muestras secuenciadas. Conclusiones: este es el primer reporte de mutaciones puntuales en el gen dhps de Plasmodium falciparum en el departamento de Bolivar, Colombia, lo cual contribuye al conocimiento de la resistencia a los antimalaricos en el Caribe colombiano. Introduction: antimalarial drug resistance hinders the control of malaria in Colombia. The molecular surveillance of point mutations in therapeutic targets is essential in the study of antimalarial drugs. Objective: to identify point mutations at dihydropteroate synthetase gene of Plasmodium falciparum (pfdhps) associated with sulfadoxine resistance. Methods: source of P. falciparum DNA was blood thick smears of 55 individuals with malaria infection, reported in Bolivar, Colombia. The DNA was extracted with 5 %. Chelex-100 solution. The mutations were identified by PCR-RFLP and sequencing. Results: seventeen samples (31 %) amplified a 438 bp fragment of pfdhps. The PCR-RFLP (polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism) showed a frequency of mutant genotype (G-437) in 65 % of amplicons, mixed genotype (A/G-437) in 29 % and wild genotype (A/G-437) in 6 %. The mutant alleles G-437, F-436 and the wild allele K-540 were identified in all sequenced samples. Conclusions: this is the first report of point mutations in the P. falciparum dhps gene in Bolivar, Colombia. This result contributes to the knowledge of antimalarial drug resistance in the Colombian Caribbean region.
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