ANÁLISE DA REGULAÇÃO DA EXPRESSÃO, MEDIADA POR FITO-HORMÔNIOS, DAS UREASES DE SOJA

Ureases sao metaloenzimas dependentes de niquel, que catalisam a hidrolise da ureia a amonia e dioxido de carbono. Essas enzimas sao encontradas em plantas, bacterias e fungos. Nas plantas, desempenham papel importante no metabolismo e biodisponibilidade de nitrogenio, mas tambem participam do arsenal de defesa contra fitopatogenos, principalmente fungos e bacterias. Atualmente sabe-se pouco sobre os mecanismos que regulam da expressao das ureases em plantas e, acredita-se que, alem da sua atividade catalitica, as mesmas sejam proteinas de defesa dos vegetais. Na leguminosa Canavalia ensiformis , feijao de porco, observou-se que uma familia genica de ureases e induzida quando folhas sao expostas ao acido abscisico, fitormonio envolvido em resposta a estresse. Em nosso estudo observamos a regulacao da expressao de genes da urease em plantas de soja submetidas a tratamentos diferentes, aplicacao de fitormonios, herbivoria e dano mecânico por MecWorm. Sementes de soja, cultivar Williams 82, foram germinadas e mantidas em câmara de crescimento ate estagio fenologico adequado para realizacao dos ensaios. Os experimentos realizados foram de anatomia do vegetal, estudo cinetico, aplicacao de fitormonios, herbivoria com Spodoptera littoralis e dano mecânico provocado por MecWorm. Foram mensurados o numero de transcritos das ureases ubiqua e proteina acessoria UreG bem como a quantidade de proteina e atividade ureasica especifica. Resultados, por nos encontrados, indicam um incremento no numero de transcritos da urease ubiqua, apos a aplicacao de acido jasmonico e da UreG apos uso do acido jasmonico. A expressao urease ubiqua foi aumentada no tratamento de herbivoria e supressao no tratamento com MecWorm. A expressao de UreG foi diminuida nos tratamentos com MecWorm, Spodoptera littoralis e aplicacao exogena de acido giberelico. Folhas e radicula apresentaram os maiores numeros de transcritos para urease ubiqua. A atividade ureasica das folhas excisadas nao foi modificada pelo tratamento com os fitormonios, ou pelos estresses causados por herbivoria e MecWorm. A partir do conjuto de experimentos, podemos concluir que a atividade enzimatica das ureases, relevante na reciclagem de nitrogenio, e “constitutiva”, e que os seus niveis basais sao suficientes para desempenhar essa funcao. Por outro lado, a funcao de defesa das ureases, que nao necessita da sua atividade enzimatica, pode sofrer uma regulacao diferencial em resposta a diferentes formas de estresse.