N-乙酰半胱氨酸和微囊藻毒素-LR联合暴露对中国仓鼠卵巢细胞凋亡的影响

2013 
目的研究N-乙酰半胱氨酸(NAC)和微囊藻毒素-LR(MC—LR)联合暴露对中国仓鼠卵巢(cH0)细胞凋亡的影响。方法取对数生长期细胞,分别加入0(对照)、1、5、10、20、30、40、50、60、80mmol/L的NAC溶液以及终浓度为0、1、5mmol/L的NAC溶液+终浓度为0、2.5、5、10~g/ml的MC—LR溶液培养24h。采用四甲基偶氮唑蓝(M1Tr)试验检测细胞活性,采用2,7-二氯荧光乙酰乙酸盐(DCFH—DA)法检测细胞内活性氧(ROS)含量的变化,采用四氯四乙基苯并咪唑基羰花青碘化物(JC-1)荧光探针法检测线粒体膜电位的变化,采用膜联蛋白v-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶(Annexinv—FITC/PI)双染法检测细胞凋亡率。结果1、5mmol/LNAC单独作用对细胞活性无明显抑制作用,且细胞存活率均在80%以上;NAC与MC—LR同时作用时,细胞活性增加,ROS含量减少,线粒体膜电位升高,凋亡率减少。结论MC—LR可诱导CHO细胞产生大量ROS从而引起细胞凋亡,抗氧化剂NAC可拮抗MC—LR诱导ROS生成导致的细胞凋亡。
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