Efecto de Cuatro Métodos de Separación Seminal sobre la Cali- dad y la Capacidad Fertilizante in vitro de Espermatozoides Equinos Criopreservados EFFECT OF FOUR SPERM SEPARATION METHODS ON QUALITY AND In vitro FERTILIZING CAPACITY OF CRYOPRESERVED STALLION SPERMATOZOA

El objetivo del presente estudio fue evaluar el efecto de cuatro metodos de separacion seminal sobre la calidad y la capacidad fertilizante in vitro de espermatozoides equinos criopreservados. Se utilizaron pajillas de semen equino criopreservado para la separacion espermatica a traves de los metodos Androcoll, CushionFluid, EquiPure y Percoll. Mediante un sistema analizador de clase (SCA®) se evaluo la motilidad total, motilidad progresiva, velocidad curvilinea, velocidad lineal y velocidad media, y por microscopia de fluorescencia se determinaron los acrosomas intactos y la vitalidad espermatica. La evaluacion de la capacidad fertilizante in vitro se realizo mediante la fertilizacion in vitro de oocitos bovinos con espermatozoides obtenidos en cada metodo de separacion. El clivaje se determino despues de tres dias de cultivo in vitro. Los resultados se analizaron mediante modelos lineales generalizados (GLM) y las medias para los diferentes metodos se compararon usando la prueba de Tukey. El CushionFluid fue superior para la mayoria de parametros de movilidad espermatica, asi como para acrosomas intactos (p<0.05). Se encontraron medias superiores de vitalidad espermatica para EquiPure y Percoll (p<0.05), pero no se encontro diferencia entre las medias de clivaje entre tratamientos. Se concluye que el semen equino criopreservado y seleccionado por el metodo CushionFluid presenta mejores parametros de calidad espermatica respecto a los otros tres metodos; sin embargo, no se evidencia diferencia entre ellos para la capacidad fertilizante in vitro de los espermatozoides. Palabras clave: calidad seminal, centrifugacion, criopreservacion, fertilizacion in vitro