转染真核表达载体pGFAP-IRES2-EGFP-p27对星形胶质细胞增殖的抑制作用

目的：探讨脂质体介导真核表达载体pGFAP-IRES2-EGFP-p27转染体外培养星形胶质细胞后对其增殖的影响。方法：利用脂质体将质粒pGFAP-IRES2-EGFP-p27转染入纯化培养的星形胶质细胞，通过免疫荧光化学标记观察转染质粒pGFAP-IRES2-EGFP-p27后星形胶质细胞内外源基因EGFP、p27的表达情况，并观察其对星形胶质细胞Ki67表达的影响。结果：脂质体介导质粒pGFAP-IRES2-EGFP-p27转染后24h即开始有EGFP的表达，48-72h EGFP表达达高峰；通过免疫荧光标记发现，表达EGFP的细胞同时有p27表达水平明显增高；和EGFP阴性细胞相比，EGFP阳性细胞中Ki67的阳性率明显下调（P〈0．01）。结论：GFAP启动子能启动目的基因p27和EGFP在星形胶质细胞的表达；连于p27的下游EGFP可作为报告基因，通过观察EGFP的表达可了解外源性p27的表达情况；导入外源性p27能有效抑制星形胶质细胞的增殖。