基于B646L、EP402R、MGF360/505基因的非洲猪瘟病毒ERA检测方法的建立

目的 建立一种基于酶促重组酶扩增(Enzymatic recombinase amplification，ERA)技术的非洲猪瘟病毒(African swine fever virus，ASFV) DNA快速检测方法。 方法 参考ASFV B646L基因、EP402R基因和多基因家族成员MGF360/505基因保守序列，设计特异性的ERA探针和引物，经过反应条件的优化，建立42 ℃等温条件下检测ASFV DNA的ERA方法。 结果 ERA-ASFV-B646L、ERA-ASFV-EP402R和ERA-ASFV-MGF 3个检测方法分别在16、7和13 min内即可得出检测结果；特异性强，对阳性样品拷贝数的检测下限均为102 μL−1；与我国非洲猪瘟诊断技术标准中的方法对比，结果符合率为100%。 结论 本研究建立的 ERA检测方法可以用于ASFV的快速检测，为流行病学调查和现场检测提供了一种快速有效的检测方法。