GM-CSF和EB病毒LMP2 A融合基因的表达及抗肿瘤特性研究

目的：构建GM-CSF和EB病毒LMP2A融合基因的重组腺病毒，对重组腺病毒进行鉴定及免疫学研究。方法：采用RT-PCR及Western blot方法检测重组腺病毒GC2A基因表达，用ELISA方法对vAd-GC2A刺激小鼠产生的抗体水平进检测及分析，乳酸脱氢酶法检测其对小鼠的细胞免疫功能的影响，采用t检验方法对重组腺病毒的免疫效果进行初步分析和评价。结果：PCR扩增重组腺病毒GC2A片段大小为1961 bp，与预期结果一致；蛋白质印迹法检测结果显示，重组腺病毒vAd-GC2A表达的蛋白能被血清GM-CSF抗体（或LMP2A抗体）识别；ELISA检测结果表明，vAd-GC2A能刺激机体产生抗体，随着免疫时间的延长，重组腺病毒刺激机体产生的抗体增长较快；重组腺病毒诱导的CTL对EBV阳性肿瘤细胞的杀伤率为（66.7±6.9）％，而腺病毒5型野毒株和PBS的杀伤率分别为（24.3±2.5）％和（32.4±3.1）％（P≤0.05）。结论：构建的重组腺病毒可表达GC2A基因，vAd-GC2A在小鼠体内可激活体液免疫和细胞免疫功能，有望成为预防和治疗EB病毒阳性肿瘤的新手段。