Des globules rouges humains biotinylés : une approche prometteuse pour la mesure de leur survie dans des études cliniques

Contexte La biotine (Bio) est une alternative aux radioisotopes pour tracer les globules rouges (GR). La survie de plusieurs populations de GR couverts de differentes densites de Bio a ete comparee simultanement lors d’etudes cliniques americaines en suivant leur survie dans la circulation ex vivo par cytometrie en flux (CF) avec la Streptavidine (SA) (Mock et al, Transfusion, 2018). A ce jour, les BioGR transfuses a l’homme et le reactif BioSulfoNHS ne sont pas conformes aux BPF. De plus les BioGR (Bio≥ 18 μg/mL) ont provoque, dans de rares cas, une immunisation des receveurs (Schmidt et al, Transfusion 2017). C’est un frein pour les autorites reglementaires europeennes. Objectif Decrire un protocole de multi-marquage des GR conforme aux BPF en raffinant les niveaux de Bio≤ 18 μg/mL. Methode La sterilite est assuree tout au long du procede. Les GR proviennent de Concentres de GR standards. La BioSulfoNHS est de grade BPF et le tampon de lavage injectable. L’efficacite du marquage est evaluee en CF avec la SA couplee a 2 fluorochromes differents phycoerythrine (PE) ou le brillant violet (BV421). Resultats Le marquage avec la BioSulfoNHS grade BPF ou non BPF est comparable ( Tableau 1 ) et 4 populations de GR sont distinctes. SABV421 de brillance superieure a SAPE est un outil prometteur pour amplifier la detection des BioGR dans la gamme de Bio≤ 18 μg/mL ( Tableau 2 ). Conclusion Cette etude preliminaire explore la faisabilite de produire des BioGR destines aux etudes cliniques. Les avantages de la methode sont de s’affranchir de radioisotopes, de reduire le risque d’immunisation, de suivre simultanement plusieurs populations de GR, en consequence de limiter le nombre de volontaires.