基于Calpain/p35-Cdk5/p25通路探究肾脑复元汤联合hUC-MSCs干预对缺氧缺糖神经元的保护作用

目的：基于Calpain/p35-Cdk5/p25通路探究肾脑复元汤联合人脐带间充质干细胞（h UC-MSCs）干预对缺氧缺糖神经元的保护作用。方法：原代培养神经元,并随机分为正常组、模型组（缺糖缺氧造模,OGD）、中药组（OGD＋含中药血清）、干细胞组（OGD＋h UC-MSCs共培养）、联合组（OGD＋含中药血清＋h UC-MSCs共培养）、抑制剂组（OGD＋Calpain抑制剂）,采用CCK-8法检测神经元活力,AO/EB染色观察细胞形态学变化,流式细胞仪检测各组细胞凋亡率,Werstern blot法检测Cdk5、p25、p35的表达。结果：模型组神经元缺糖缺氧后,突起回缩,轴突网络稀释,细胞核变性、甚至碎裂,与正常组比较,细胞活力明显下降,大量细胞凋亡,Cdk5、p25表达明显上升,p35表达明显下降（P〈0.01）;与模型组比较,中药组、干细胞组、联合组及抑制剂组神经元活力升高,凋亡细胞数降低,Cdk5及p25表达下降,p35表达上升（P〈0.05,P〈0.01）;与中药组、干细胞组及抑制剂组相比,联合组神经元活力升高、早凋细胞减少（P〈0.05）;联合组及抑制剂组CDK5、p25表达较中药组及干细胞组下降,p35表达较中药组及干细胞组上升（P〈0.05）。结论：肾脑复元汤联合h UC-MSCs移植能显著改善缺糖缺氧神经元凋亡,其作用机制可能与调控Calpain/p35-Cdk5/p25通路有关。